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常见的食品微生物样品的前处理制备

发布时间:2023-06-20来源:海博网

常见的食品微生物样品的前处理制备

食品微生物检验对于食品安全至关重要,而样品前处理是确保检验准确性的关键。我们每天所吃的食品,都需要经过严格的检验才能放心食用保障食品安全,从检验开始。为了确保检验质量,整个微生物检验过程在无菌操作的条件下进行。除了样品要有代表性,样品前处理也是关键,包括样品的保存、表面消毒、样品制备等。下面深圳后王小编整理了常见食品微生物检验样品的制备食品微生物样品的前处理

一、样品保存

收到样品后应尽快检验,如需保存,应在接近原有贮存温度条件下贮存样品,或采取必要措施防止样品中微生物数量的变化(冷藏和易腐样品:2℃~5℃;冷冻样品:-15℃以下冰箱内;干燥样品:常温阴凉干燥处保存)。冷冻样品需在原容器中解冻,2℃~5℃不超过18小时或45℃不超过15分钟,解冻后尽快检测。

二、取样要有代表性

如系固体样品,取样时不应集中一点,宜多采几个部位。

三、表面消毒

样品的制备过程均应在洁净区域内进行,样品容器开启前,应用75%乙醇消毒开启部位及其周围后,用无菌剪刀或镊子取样。

四、样品制备

检验液体或半固体样品前应先将其充分摇匀。如容器已装满,可迅速翻转25次;如未装满,可于7s内以30cm的幅度摇动25次。从混样到检验间隔时间不应超过3分钟。

(1) 固体和半固体样品:称取25g(25g±0.1g)(根据样品分布的均匀性程度,也可酌情增减样品量,如50g或50 mL等)样品放入装有225 mL稀释液(可使用生理盐水或磷酸盐缓冲液,建议使用磷酸盐缓冲溶液,因为磷酸盐缓冲溶液能更好地纠正食品样品中pH变化,对细菌具有更好的保护作用)或致病菌增菌液(如BPW、志贺氏增菌肉汤、营养肉汤、3%氯化钠碱性蛋白胨水、改良磷酸盐缓冲液、Boltonm肉汤、7.5%氯化钠肉汤、mTSB、明胶磷酸盐缓冲液、0.1%蛋白胨水、GVC增菌液、LB1增菌液、mEC+m肉汤、PNCC增菌液)的灭菌均质袋或均质杯内,稍捏碎(特别是糕点/面包及其他淀粉制品)。

1) 刀头式均质器(均质杯):8000 r/min~10000 r/min,均质 1 min~2 min。如样品均质时间超过2 min,应在均质杯外加冰水冷却。

2) 拍击式均质器(均质袋):6次 /s ~ 9次/s 拍击式均质1min~2 min。试样放入盛有稀释液的均质袋中,放入均质器,关门时夹住均质袋开口;设定拍击速度、拍击时间等;均质完成后,取出均质袋。硬块、骨状、冰状物等坚硬锐利的样品不宜使用,以免破坏均质袋。工作时禁止打开均质器门,以防试样溢洒以及对操作人员的伤害。当对易产生较大颗粒的样品(如肉类)进行检测时,建议使用带滤网(有隔)均质袋,以方便均质后用吸管吸取匀液。

(2) 干燥或干粉食品/液体样品:以无菌吸管吸取25mL样品置盛有225m稀释液或致病菌增菌液的500mL锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分摇匀,制成1:10的样品匀液。振摇时,幅度为30 cm,7 s内振摇25次,也可用机械振荡器振荡20 s代替手摇。

五、常见食品微生物检验样品的制备

(1) 带骨酱卤肉制品:用灭菌剪刀剪取样品(取可食用部分,整只家禽酱卤肉制品一般从胸或者腿部剪取。“可食用部位”一般指肌肉或组织。称量尽量避开较大的骨骼,均质方式建议选择旋转式匀质器。

(2) 乳制品(发酵乳、炼乳、稀奶油、奶油、无水奶油、乳粉、乳清粉、乳清蛋白粉、酪乳粉等):取样品加人预热至45 ℃的稀释液或培养基中,均质制成样品匀液。

1) 乳及液态乳制品的处理:将检样摇匀,以无菌操作开启包装。塑料或纸盒(袋)装,用75 %酒精棉球消毒盒盖或袋口,用灭菌剪刀切开;玻璃瓶装,以无菌操作去掉瓶口的纸罩或瓶盖,瓶口经火焰消毒。用灭菌吸管吸取25 mL(液态乳中添加固体颗粒状物的,应均质后取样)检样,放入装有225 mL灭菌生理盐水的锥形瓶内,振摇均匀。

2) 炼乳:清洁瓶或罐的表面,再用点燃的酒精棉球消毒瓶或罐口周围,然后用灭菌的开罐器打开瓶或罐,以无菌手续称取25 g检样, 放入预热至45 ℃的装有225 mL灭菌生理盐水(或其他增菌液)的锥形瓶中,振摇均匀。

3) 稀奶油、奶油、无水奶油等:无菌操作打开包装,称取25 g检样, 放入预热至45 ℃的装有225 mL灭菌生理盐水(或其他增菌液)的锥形瓶中,振摇均匀。从检样融化到接种完毕的时间不应超过30 min。

4) 乳粉、乳清粉、乳糖、酪乳粉:取样前将样品充分混匀。罐装乳粉的开罐取样法同炼乳处理,袋装奶粉应用 75%酒精的棉球涂擦消毒袋口, 以无菌手续开封取样。称取检样 25 g,加入预热到 45 ℃盛有 225 mL 灭菌生理盐水等稀释液或增菌液的锥形瓶内(可使用玻璃珠助溶),振摇使充分溶解和混匀。对于经酸化工艺生产的乳清粉,应使用pH 8.4±0.2的磷酸氢二钾缓冲液稀释。对于含较高淀粉的特殊配方乳粉,可使用α-淀粉酶降低溶液粘度,或将稀释液加倍以降低溶液粘度。

5) 酪蛋白和酪蛋白酸盐:以无菌操作,称取25 g检样,按照产品不同,分别加入225 mL灭菌生理盐水等稀释液或增菌液。在对粘稠的样品溶液进行梯度稀释时,应在无菌条件下反复多次吹打吸管,尽量将粘附在吸管内壁的样品转移到溶液中。

a) 酸法工艺生产的酪蛋白:使用磷酸氢二钾缓冲液并加入消泡剂,在pH 8.4±0.2的条件下溶解样品。

b) 凝乳酶法工艺生产的酪蛋白:使用磷酸氢二钾缓冲液并加入消泡剂,在pH 7.5±0.2的条件下溶解样品,室温静置15 min。必要时在灭菌的匀浆袋中均质2 min,再静置5 min后检测。

c) 酪蛋白酸盐:使用磷酸氢二钾缓冲液在pH 7.5±0.2的条件下溶解样品。

(3) 干酪及制品:对有涂层的样品削去部分表面封蜡,对无涂层的样品直接用灭菌剪刀切开干酪,用灭菌勺从表层和深层分别取有代表性的适量样品,磨碎混匀称取样品。加入预热至45℃的稀释液或培养基,均质制成样品匀液,均质过程应尽量避免泡沫产生。

(4) 冰棍及雪糕:用灭菌镊子除去包装纸,将冰棍部分放入灭菌广口瓶内,木棒留在瓶外,蓝上瓶盖,用力抽出木棒,或用灭菌剪子剪掉木棒,置45℃水浴15分钟,溶化后立即进行检验。

(5) 冰淇淋、食用冰、甜味冰、雪泥及其他:放在灭菌容器内,待其溶化,立即取样进行检验。

(6) 糖果、巧克力及巧克力制品:用灭菌镊子夹去包装纸,称取数块共25g,加入预温至45℃的225mL灭菌稀释液或增菌液中,等溶化后检验。

(7) 可吸果冻:带管盖的袋装可吸果冻,取样时应从袋身中上部剪开取样检验。

(8) 带壳炒货及坚果制品:无菌操作去壳或碾碎后取样检验。根据样品的食用方式、外壳的坚硬程度及单个体积的大小,合理选择适宜的制备方式。如: 葵花籽采取直接碾压的方式,核桃采取去壳后取样的方式。

(9) 糕点:如为原包装,用灭菌镊子夹下包装纸,采取外部及中心部位,如为带馅点取外皮及内馅25g,裱花糕点,采取奶花及糕点部分各一半共25g检验。

(10) 酱类和酱油:用灭菌蒸馏水代替0.85%的无菌生理盐水作为样品稀释液,均质制成样品匀液。

(11) 醋:用20%~30%无菌碳酸钠溶液调节pH至中性后,取样检验。

(12) 瓶(桶、罐)装饮料:用点燃的酒精棉球烧灼瓶口灭菌,用石炭酸纱布盖好,塑料瓶口可用75%酒精棉球檫拭灭菌,用灭菌开瓶器将盖开启;含有二氧化碳的饮料可倒人另一个灭菌容器内,口勿盖紧,覆盖一灭菌纱布, 轻轻振荡,待气体全部逸出后,取样检验。

(13) 罐头:去除表面标签,在包装容器表面用防水的油性记号笔做好标记,并记录容器、编号、产品性泄漏情况、是否有小孔或锈蚀、压痕、膨胀及其他异常情况。

(14) 带壳蛋类:对蛋壳表面清洁消毒,无菌操作打开部分蛋壳,用灭菌勺取样品(含蛋白和蛋黄)检验。

(15) 鱼类和头足类动物取表面组织、肠或鳃。贝类取全部内容物,包括贝肉和体液;甲壳类取整个动物,或者动物的中心部分,包括肠和鳃。如为带壳贝类或甲壳类,则应先在自来水中洗刷外壳并甩干表面水分,然后以无菌操作打开外壳,按上述要求取相应部分。


下一个:部分天然色素在食品中的应用 2023-06-18

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